目的探讨维奈克拉联合泽布替尼对骨髓微环境中急性髓系白血病（AML）细胞的杀伤作用及相关分子机制。方法建立HS5基质细胞与AML细胞（KG1/THP1）共培养模型，模拟骨髓微环境。采用细胞计数试剂盒8（CCK8）和 Annexin VAPC/7AAD双染法检测药物对细胞增殖和凋亡的影响。通过翻译后修饰（TMT）标记定量磷酸化蛋白质组学分析差异表达的蛋白，并进行生物信息学分析；Westernblot分析关键信号通路蛋白的磷酸化水平。结果维奈克拉联合泽布替尼对共培养后的AML细胞表现出协同抗肿瘤效应，显著抑制增殖并诱导凋亡。磷酸化蛋白质组学鉴定出的关键差异蛋白主要富集于PI3K/AKT、BCL2及BTK通路。Westernblot证实，联合用药协同下调 pBTK、pAKT/pGSK3β、pSTAT3、pCDK1及pERK等的磷酸化水平。结论维奈克拉协同泽布替尼杀伤骨髓微环境的AML细胞，可能与抑制pBTK、pAKT/pGSK3β、pSTAT3、pCDK1、pERK等信号通路分子有关。