目的系统评估免疫营养素硒酵母片（Se）、维生素D（VD）在CHOP化疗后对B细胞淋巴瘤小鼠肠道菌群多样性及炎症指标的调控作用。方法60只6周龄雌性BALB/c小鼠随机分为6组（n=10）：正常对照（NRM）组、肿瘤对照（CON）组、生理盐水（NS）组、Se组\[200 mg/(kg·d）\]、VD组\[2 000 IU/(kg·d）\]和联合干预（MIX，Se+VD）组。除NRM组外，其余各组于实验前15天皮下注射A20细胞建立荷瘤模型，于化疗当天给予CHOP方案一次性腹腔注射（环磷酰胺100 mg/kg、多柔比星6 mg/kg、长春新碱0.1 mg/kg、地塞米松0.2 mg/kg），次日开始免疫营养素灌胃干预10 d。于化疗当天及干预第1、5、10天采集粪便进行16S rDNA测序（V3~V4区），分析α多样性\[丰富度指数（Chao1）、微生物多样性指数（Shannon）、辛普森指数（Simpson）、群落系统发育多样性指数（Faiths PD）\]、β多样性\[无度量多维标定法（NMDS）\]、线性判别分析效应大小（LEfSe）分析差异菌群及Pearson相关。第10天取血ELISA检测肿瘤坏死因子α（TNFα）。统计学分析采用KruskalWallis H检验、广义估计方程（GEE）模型和Pearson相关。结果Se组、VD组、MIX组肿瘤体积较NS组显著减小（P<0.05）；TNFα在Se组、VD组显著下降（P<0.05）。化疗后第1天α多样性显著下降（P<0.05），干预组第10天Shannon和Simpson指数显著回升（P<0.05），NMDS显示MIX组群落结构接近NRM组。属水平VD组富集Ligilactobacillus，Se组富集Cloistral，MIX组富集Bacteroides_H。相关性分析显示Ligilactobacillus、Kineothrix与TNFα及肿瘤体积呈负相关，与CAG485、COE1呈正相关（P<0.05）。结论Se、VD及两者联合干预可与CHOP化疗联合呈现更优趋势，通过改善菌群多样性、调节群落结构和抑制促炎菌属，有效降低炎症水平与肿瘤负担，为B细胞淋巴瘤的营养支持提供理论依据。